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大肠埃希菌是医院获得性及社区获得性感染中较为常见的革兰阴性菌.H-NS 是一种小组蛋白相似蛋白,它不仅参与基因组装配,而且在基因调控中也起关键作用.本研究以大肠埃希菌MG1655 为研究对象,将pKD46 质粒转化入MG1655 感受态细胞.以质粒pKD3为模板扩增氯霉素抗性基因片段,并将其转化入MG1655/pKD46,氯霉素抗性平板筛选阳性克隆.利用pCP20 质粒删除氯霉素抗性基因,构建MG1655 hns 基因缺失菌株.96 孔板结晶紫染色法分析MG1655 hns 基因缺失株生物膜形成能力的变化.苯酚-硫酸法检测细菌胞外多糖含量.研究结果显示氯霉素抗性基因消除后的hns 基因缺失株PCR 产物长度为434bp,测序鉴定正确,成功构建MG1655 △hns 基因缺失株.MG1655 △hns 菌株生物膜形成能力和胞外多糖产生显著低于MG1655(P＜0.01).本研究利用Red 重组技术成功构建出MG1655 △hns 菌株,hns 基因对细菌生物膜的形成具有重要的调控作用.