【摘 要】
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本研究根据已发表的人源大肠杆菌1型菌毛fimH基因序列,以产1型菌毛菌株MG2(011)、YR5(078)、MG12(018)基因组DNA为模板,对大肠杆菌1型菌毛fimH基因进行了扩增并与国外同源菌株基因序列进行了比较.结果表明:核酸同源性分别为97.8％、99.7％、97.8％,氨基酸序列的相似性分别达到98.7％、99.3％、98.0％.运用DNASTAR对fimH蛋白二级结构图谱、抗原位点
【机 构】
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金陵科技学院动物科学与技术学院 南京 210038
【出 处】
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中国畜牧兽医学会信息技术分会第十二届学术研讨会
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本研究根据已发表的人源大肠杆菌1型菌毛fimH基因序列,以产1型菌毛菌株MG2(011)、YR5(078)、MG12(018)基因组DNA为模板,对大肠杆菌1型菌毛fimH基因进行了扩增并与国外同源菌株基因序列进行了比较.结果表明:核酸同源性分别为97.8％、99.7％、97.8％,氨基酸序列的相似性分别达到98.7％、99.3％、98.0％.运用DNASTAR对fimH蛋白二级结构图谱、抗原位点图谱、亲水性图谱进行预测分析,发现它们二级结构、抗原位点及亲水性基本相似,这说明fimH基因序列及氨基酸序列的变异并未影响fimH蛋白的结构.据此认为筛选fimH抗原表位制备的抗体应该可以针对大部分的1型菌毛fim蛋白起反应,本研究筛选了氨基酸序列第111?124位的序列合成多肽,多肽纯度为81.0％.将合成的该序列多肽免疫小鼠制备单克隆抗体,用单克隆抗体进行了对带有1型菌毛的鸡大肠杆菌气管纤毛上皮的粘附抑制试验,结果显示该单抗对4个血清型的1型菌毛菌株的抑制效率达到了82.98％?97.67％,说明该单抗可显著抑制1型菌毛大肠杆菌对鸡气管上皮的粘附,而未加单克隆抗体作用的鸡大肠杆菌对气管粘膜上皮的粘附度很高,二者差异极显著.试验结果表明,该多肽为与菌毛粘附作用密切的功能表位.
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