论文部分内容阅读
本研究的目的在于利用重组猪结合珠蛋白(Haptoglobin，Hp)制备特异性单克隆抗体。
方法是以梅山猪肝脏总RNA为模板，利用RT-PCR方法扩增猪hp基因，将其克隆到原核表达载体pGEX-KG和pET-32a上，转化至E.coliBL21中，IPTG诱导下高效表达重组GST-Hp和HIS-Hp蛋白。用纯化的重组GST-Hp免疫BALB/c小鼠，用纯化的HIS-Hp作为包被抗原进行间接ELISA检测，通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选阳性细胞株，制备单克隆抗体。
结果表明筛选到2株高效分泌抗猪Hp单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为384和3C8。Western-blot和间接ELISA检测均表明制备的单克隆抗体具有良好的特异性。