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目的:考察不同显色剂对紫外-可见分光光度法测定玉竹总皂苷含量的影响,确定最优显色方法。
方法:采用紫外-可见分光光度法测定玉竹总皂苷含量,分别用三种显色剂,显色剂A为浓硫酸:甲醇(4:1),检测波长为405nm;显色剂B为5%香草醛-冰醋酸:高氯酸:醋酸乙酯(2:8:10),检测波长为518nm;显色剂C为5%香草醛-冰醋酸:高氯酸:冰醋酸(2:8:10),检测波长为518nm。
结果:采用A、B、C三种显色剂所得线性方程分别为Y=2.490 0X-0.012 4(r=0.999 9),Y=2.007 6X+0.006 4(r=0.999 6),Y=1.915 2X+0.013 5(r=0.999 9),线性范围均为6~36 μg/mL。A、B、C三种方法测得样品RSD分别为1.90、1.15和0.92,低、中、高三个浓度的加样回收率分别为(93.05±1.89)%、(94.43±1.77)%、(93.69±0.52)%,(93.91±1.03)%、(94.35±0.69)%、(95.22±1.69)%和(99.18±1.47)%、(100.32±0.72)%、(99.65±0.66)%(n=5),测得样品含量分别为80.40%、70.14%和69.80%。
结论:方法C为最佳显色方法,溶液稳定性最好,重复性实验RSD最小,加样回收率实验回收率最高。