【摘 要】
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目的：通过体外实验探讨Paxillin在VEGF-A诱导的HUVEC细胞运动和侵袭中的所起的作用.方法：体外设计Paxillin小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA),并转染传代培养的人脐
【机 构】
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武汉大学人民医院眼科中心,武汉大学人民医院眼科研究所 430060
【出 处】
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第十二届全国角膜及眼表疾病学术大会暨第四届全国角膜屈光手术大会
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目的：通过体外实验探讨Paxillin在VEGF-A诱导的HUVEC细胞运动和侵袭中的所起的作用.方法：体外设计Paxillin小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA),并转染传代培养的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)中,并分为3组,其中两组HUVEC分别转染Paxillin siRNA,scramble siRNA(对照组),与正常HUVEC组,并用VEFG-A作用.实时定量PCR和蛋白质印迹法检测HUVEC细胞中Paxillin基因表达的变化,噻唑蓝(MTT)比色法及Edu试剂盒检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期变化,Boyden小室检测运动级侵袭的变化,以及HUVEC细胞体外管腔样成形及粘附的变化.结果：VEGF-A作用后HUVEC细胞周期、粘附运动及侵袭能力均增强(P＜0.05),黏附、迁移及侵袭穿膜细胞数较对照明显增多(P＜0.05).Paxillin-siRNA组增粘附运动及侵袭能力均减弱(P＜0.05),实时定量PCR和蛋白质印迹检测显示siRNA组Paxillin表达下调.结论：针对Paxillin基因的siRNA可以抑制VEGF-A诱导下的HUVEC细胞侵袭力和运动能力,为后续的角膜新生血管体内研究奠定基础.
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