一株米曲霉菌株的核型分析及萌发时间研究

来源 :华东六省一市生物化学与分子生物学会2015年学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:marina12345
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米曲霉作为美国食品药品管理局认证的GRAS级别菌种,在传统工业中常被用于酱油,米酒,豆瓣酱等食品调料的生产,近年来随着分子生物学技术的发展以及米曲霉基因组的破译公开,加之其本身具有的向胞外分泌大量不同蛋白的能力使得其在现代农业,食医药行业也得到了广泛的开发应用.米曲霉本身能产生含有一个及以上数目的核的菌丝体及分生孢子,米曲霉中多核现象的产生是生物长期进化的结果,这种复杂的核型使得对米曲霉遗传学上具有多型性;这种多核现象一直被认为可以弱化对米曲霉基因的改造,从而对传统突变育种以及现代分子育种遗传稳定性问题提出了挑战.本文拟通过对米曲霉的核型分析及孢子萌发时间等基础研究探讨米曲霉的遗传多型性及其生长过程中核型变化的调控机理. 米曲霉分生抱子是直接能够获得的单个细胞个体,更利于核型分析及后续的遗传学研究。本试验以本实验室分离获得的一株米曲霉为出发菌株,经察氏培养基30℃培养数天,收集并过滤获得分生孢子悬液。采用DAPI核染色分析,经荧光显微镜观察并计数了440个分生孢子中核数目分配情况,发现10%左右为单核孢子,36%左右为双核,25%为三核,其他为四核以上孢子。采用膜过滤技术分离富集单核与多核孢子,进一步研究液体培养条件下孢子萌发时间和萌发率,结果表明本发酵条件下培养4.5h孢子普遍萌发,萌发率在80%以上。以上结果为深入探讨米曲霉生长过程核型变化的调控机制打下基础。
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