论文部分内容阅读
在囊泡运输过程中,定位在靶膜上的t-SNARE 蛋白和定位在囊泡膜的R-SNARE 蛋白装配形成有功能的SNARE 复合体,促进了囊泡与靶膜的融合.植物胞质分裂的特征是在细胞分裂面形成细胞板膜结构.SNARE 蛋白介导的膜融合促进细胞板的形成以及细胞板成熟形成新的细胞膜(壁).目前,有关参与细胞板形成的R-SNARE 蛋白的研究还十分有限.我们通过遗传学、分子生物学、细胞学等方法对拟南芥R-SNARE 蛋白VAMP721 和VAMP722 的亚细胞定位和生理功能进行了初步研究.通过荧光蛋白标记和显微镜观察发现,VAMP721 和VAMP722 在根尖细胞中定位在质膜和胞质内的反面高尔基体管网(TGN),即早期内涵体;在分裂细胞中,VAMP721 和VAMP722 还定位在胞质分裂中的细胞板.通过相关突变体表型分析发现,VAMP721 和VAMP722 的单突变体和杂合双突变体不影响植株生长发育,纯合双突变体只能在幼苗期存活,表明这两个基因功能冗余.我们进一步对纯合双突变体幼苗进行研究,发现VAMP721 和VAMP722功能缺失严重影响了幼苗的发育,根极短,生长畸形,细胞紊乱、不规则.半薄切片观察表明,纯合双突变体影响了胞质分裂,导致产生不完整细胞壁和双核细胞.通过标记蛋白的亚细胞定位观察分析表明,VAMP721 和VAMP722 特异性介导了膜蛋白分泌运输到质膜的过程以及细胞板的形成.综合上述研究结果,我们推测VAMP721 和VAMP722 蛋白标记的囊泡和内涵体是从TGN 分泌出来,负责将膜蛋白分泌运输到质膜;在分裂细胞中,介导囊泡运输到细胞分裂面参与细胞板的形成.