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目的 研究银杏酸GA (17∶1)及其Ⅰ相代谢对原代肝细胞、HepG2毒性的影响,以及P-gp对MDCK细胞毒性的影响.方法 (1)应用大鼠肝微粒体体外孵育的方法,选用特异性的酶化学抑制剂,α-萘黄酮(CYP1A1/2),磺胺苯吡唑(CYP2C6),奎宁(CYP2D1),4-甲基-吡唑(CYP2E1)和酮康唑(CYP3A2),进行CYP酶代谢抑制研究,确定参与GA (17∶1)的代谢的CYP亚型.(2)采用MTr法分别测定银杏酸(17∶1)系列浓度5,10,20,40,50,80 μM在4h,12h,24 h的HepG2细胞存活率.并测定加入25μM β-萘黄酮(诱导CYP1A2和UGT1A),10 μM利福平(诱导CYP2C9,CYP3A4和UGT1A)后的细胞存活率.(3)同法测定GA (17：1)系列浓度在24 h大鼠原代肝细胞的存活率,以及与25 μMα-萘黄酮(抑制CYP1A1/2)10 μM酮康唑(CYP3A2抑制剂)共孵育后的细胞存活率.(4)采用MTT法分别测定GA (17∶1)系列浓度5,10,20,40,50,80,100 μM 12 h时MDCK,MDCK-MDR1,MDCK-MDR1-CYP3A4的细胞存活率.结果 (1)酮康唑和α一萘黄酮是能够显著的抑制GA (17∶1)代谢.(2) GA (17∶1)对HepG2细胞毒性呈时间-浓度依赖性,其IC50值为59.3±6.21 μM.给予CYP诱导剂后,HepG2细胞的存活率明显降低,加入10 μM利福平的lC5o值为46.7±5.43μM,25 μM β-萘黄酮后的ICso值为40.5±4.78 μM.(3) GA (17∶1)对大鼠原代肝细胞有明显的浓度依赖性,其IC50值为76.3±9.37 μM,大鼠原代肝细胞在给CYP抑制剂后,与对照组相比,发现细胞存活率均有不同程度的提高.(4) MTT结果表明,GA (17∶1)对不同类型的MDCK细胞均有一定的毒性,其IC50在MDCK,MDCK-MDR1,MDCK-MDR1-CYP3A4分别为37.9±7.47μM,48.9±9.61 μM,31.8±5.34 μM.结论 (1)在大鼠肝微粒中,CYP 3A2和CYP1A1/2亚型为GA (17∶1)的主要代谢酶.(2) CYP酶的化学诱导剂β-萘黄酮和利福平能够降低HepG2细胞的存活率,CYP酶的化学抑制剂α-萘黄酮和酮康唑能够增加原代肝细胞的存活率,Ⅰ相代谢酶CYP1A和3A能够介导GA (17∶1)的毒性.(3) GA (17∶1)对细胞MDCK-MDR1比MDCK的毒性弱,说明P-gp对GA (17∶1)有一定的外捧作用,而在MDCK-MDR 1-CYP3A4细胞测定的IC50值又明显减小,说明CYP3A4对GA (17∶1)毒性存在着一定的介导作用.