拟穴青蟹保幼激素结合蛋白基因克隆和表达分析

来源 :第十届世界华人虾蟹养殖研讨会暨2016年中国河蟹产业发展高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fht5403
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  保幼激素是一种重要的倍半萜烯类昆虫激素,在昆虫的生长发育过程中起着重要的调控作用.而它的保幼激素结合蛋白(JHBP)是存在于血淋巴和细胞内的一类载体蛋白,分别在保幼激素的保护、运输和受体作用中发挥重要作用.甲基法尼酯是存在于甲壳动物中的一种保幼激素类似物,被认为是甲壳动物的保幼激素,目前对其分子生物学相关方面的研究进展较为缓慢.JHBP主要分为三种:血淋巴JHBP(hJHBP),细胞质JHBP(cJHBP)和细胞核JHBP(nJHBP).本文通过建立cDNA文库和RACE克隆获得了一条与昆虫的细胞质JHBP一致性较高和两条与hJHBP一致性较高的序列,Sp-cJHBP的cDNA全长为2000 bp,开放阅读框为888 bp,编码295个氨基酸,5UTR和3UTR分别为119 bp和993 bp.预测蛋白分子量为32kD,等电点为5.14.在NCBI上blast结果表明其与昆虫的细胞质JHBP氨基酸具有较高的同源性,与家蚕的相似性为65%,大红斑蝶为63%.荧光定量PCR分析组织表达结果表明,Sp-cJHBP在卵巢中表达量最高,远远高于其他组织,其次是脑和胸神经节,在其他组织表达量很低.控,它很可能是一种甲基法尼酯结合蛋白.
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