hsa-miR-759促进胃癌细胞SGC-7901增殖的机制研究

• 作 者: 邱彦 段靖 王亚威 鲁毅
• 机 构: 解放军454医院药剂科,南京210002
• 出 处: 2016年江苏省药学大会暨第十六届江苏省药师周
• 发表日期: 2016年9期
• 关键词: 胃癌 hsa-miR-759蛋白 NGX6基因 细胞增殖

目的：研究hsa-miR-759促进胃癌细胞SGC-7901增殖机制.
方法：取临床胃癌标本5对,荧光定量法和蛋白质印迹法分别检测胃癌及癌旁组织中hsa-miR-759和NGX6蛋白含量;生物信息学预测hsa-miR-759与NGX6基因的结合位点,并通过荧光素酶报告基因法进行位点验证;化学合成hsa-miR-759类似物(hsa-miR-759mimics),hsa-miR-759阻遏物(hsa-miR-759inhibitor)及阴性对照(Negative Control,NC),通过脂质体瞬时转染至SGC-7901细胞,转染后48h,Realtime-PCR检测细胞内hsa-miR-759含量,Western blotting检测细胞中NGX6蛋白含量;MTT法检测SGC-7901细胞对数期增殖活性.
结果：胃癌组织中NGX6蛋白表达量明显低于癌旁组织(P＜0.05);胃癌组织中hsa-miR-759含量明显高于癌旁组织,组间差异显著(P＜0.05).荧光素酶活性检测数据显示,hsa-miR-759mimics和hsa-miR-759inhibitor与野生型荧光素酶报告基因表达载体共转染组可以明显抑制或增强荧光素酶活性(P＜0.05,vs野生型报告基因表达载体单独转染组).hsa-miR-759mimics转染细胞后48h,细胞内hsa-miR-759含量明显升高,NGX6蛋白表达明显降低(P＜0.05,vs对照组),hsa-miR-759inhibitor转染细胞后48h,细胞内hsa-miR-759含量明显降低,NGX6蛋白表达明显增强(P＜0.05,vs对照组),阴性对照(NC)转染组和转染对照组细胞内hsa-miR-759相对含量无明显变化,NGX6蛋白表达无显著变化(P＞0.05,vs对照组).转染后24～72h,hsa-miR-759mimics转染组SGC-7901细胞增值活性明显增强,hsa-miR-759inhibitor转染组SGC-7901细胞增值活性明显降低(P＜0.05,vs对照组),NC转染对SGC-7901细胞增殖活性无明显影响(P＞0.05,vs对照组).
结论：hsa-miR-759通过抑制NGX6基因表达,增强SGC-7901细胞的增殖活性;抑制细胞内hsa-miR-759,可以抑制SGC-7901细胞增殖活性.