【摘 要】
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目的 研究芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AhR)低表达时对巨噬细胞活化的影响. 方法 通过AhR-shRNA慢病毒载体转染RAW264.7巨噬细胞,建立AhR基因沉默的稳转细胞株,并将细胞分为三组：慢病毒转染组、空载质粒组以及空白对照组.然后向此三组细胞中加入10μg/ml LPS或100μg/ml酵母多糖,作用1h、6h、12h以及24h后,通过ELISA方法检
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆 400042
【出 处】
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2013中国医师协会中西医结合医师大会
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目的 研究芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AhR)低表达时对巨噬细胞活化的影响. 方法 通过AhR-shRNA慢病毒载体转染RAW264.7巨噬细胞,建立AhR基因沉默的稳转细胞株,并将细胞分为三组：慢病毒转染组、空载质粒组以及空白对照组.然后向此三组细胞中加入10μg/ml LPS或100μg/ml酵母多糖,作用1h、6h、12h以及24h后,通过ELISA方法检测细胞核中NF-κB P65的DNA结合活性以及细胞培养上清中TNF-α和IL-6的含量,实时定量PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA的表达. 结果 当RAW264.7巨噬细胞中AhR基因被沉默后,LPS或酵母多糖所诱发的P65的DNA结合活性显著高于阴性对照组,但是TNF-α和IL-6无论是在蛋白水平或是mRNA水平却显著低于阴性对照组. 结论 AhR在巨噬细胞的活化过程中对TNF-a和IL-6的表达具有正向调节作用,但对NF-κB P65的DNA结合活性具有负向调节作用,推测AhR可能参与了NF-κB以外的其它信号通路的调节.
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