双重荧光定量RT-PCR方法鉴别甲型和乙型流感病毒

来源 :2012第四届中国兽药大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:applebanana0204
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  为了能快速分析掌握流行性感冒病毒的型别及其流行情况,分别选取甲型流感病毒M基因128bp和乙型流感病毒NP基因107bp作为检测的目标基因,设计PCR特异性引物和不同发光基团标记的TaqMan探针,研发一种快速、准确、有效的鉴别甲型、乙型流感病毒的双重实时荧光定量RT—PCR方法,并评价其重复性、特异性和灵敏度。结果显示质粒标准曲线的方差系数为0.998,双重荧光定量RT—PcR方法灵敏度达到每个反应102拷贝/μL,特异性强。对173份流感样患者咽拭子样本检测,结果为甲型流感病毒核酸阳性52份,乙型流感病毒核酸阳性19份。表明本文所建立的双重荧光定量RT—PCR方法快速、特异、灵敏,为临床一次性鉴别诊断甲型和乙型流感病毒提供了一种快速、可靠的检测手段。
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