【摘 要】
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以人型结核分枝杆菌H37RV株基因组DNA为模板,用PCR法对ESAT-6,CFP10进行扩增,产物经纯化后与载体PMD18-T连接,转化及酶切鉴定后,亚克隆到原核表达载体PGEX-6P-1,构建重组质粒
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(哈尔滨)
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物专委会学术年会中国畜牧兽医学会生物制品学分会第九次学术研讨会
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以人型结核分枝杆菌H37RV株基因组DNA为模板,用PCR法对ESAT-6,CFP10进行扩增,产物经纯化后与载体PMD18-T连接,转化及酶切鉴定后,亚克隆到原核表达载体PGEX-6P-1,构建重组质粒,转化入大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导,产物进行SDS-PAGE电泳.结果表明,ESAT-6和CFP10与GST所表达的融合蛋白相对分子量分别为32KD和36KD,与实测相符.重组结核杆菌分泌蛋白ESAT-6和CFP10的成功表达为结核病诊断及重组疫苗的构建打下基础.
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