【摘 要】
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目的：丹参是抗肝纤维化有效中药复方扶正化瘀方的组成药味之一，现代研究表明，肝细胞凋亡是促进肝纤维化发生发展的重要机制之一.本研究拟以TNF诱导的肝细胞凋亡和NF-B转位作为筛选模型，观察丹参化学成分对其影响，为扶正化瘀方抗肝纤维化的有效物质基础研究提供部分依据。方法：低浓度(1umol/L或0.2 Ug/ml)和中浓度(10 umol/L或2 ug/ml)丹参化学成分(丹酚酸A，丹酚酸B，二氢丹参
【机 构】
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上海中医药大学附属曙光医院,上海中医药大学肝病研究所
【出 处】
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第二十一届全国中西医结合消化系统疾病学术会议
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目的：丹参是抗肝纤维化有效中药复方扶正化瘀方的组成药味之一，现代研究表明，肝细胞凋亡是促进肝纤维化发生发展的重要机制之一.本研究拟以TNF诱导的肝细胞凋亡和NF-B转位作为筛选模型，观察丹参化学成分对其影响，为扶正化瘀方抗肝纤维化的有效物质基础研究提供部分依据。
方法：低浓度(1umol/L或0.2 Ug/ml)和中浓度(10 umol/L或2 ug/ml)丹参化学成分(丹酚酸A，丹酚酸B，二氢丹参酮I，丹参酮IIA，丹参酮I，丹参素钠)与HL-7702细胞预孵育1h后，采用放线菌素D(Actinomysin D，Act D)和肿瘤坏死因子 (Tumor necrosis factorTNF)作用.h诱导人肝细胞株HL-7702凋亡，TNF作用min诱导HL-7702细胞NF-B转位。
应用Multiparameter Apoptosis 1和NF-B Actavation试剂盒染色后，药物高内涵筛选分析设备KineticScan Reader获取荧光图像，配套软件分析结果。
结果：药物高内涵筛选分析发现，ActD和TNF可诱导HL-7702细胞明显发生凋亡，表现为细胞核减小(核固缩)，线粒体物质增加;lumol/L和10umol/L的丹酚酸A、丹酚酸B预处理均能明显防止肝细胞发生凋亡，表现为防止细胞核固缩和线粒体物质增加：其它成分无明显抗细胞凋亡作用(表1)。以丹酚酸B盐为示例，显示图像结果。正常对照细胞的NF-κB主要表达于细胞质;TNFα刺激后，NF-κB分布明显向细胞核内转移，表现为细胞核.细胞质荧光强度差值、比值明显增加;丹参各化学成分无抑制NF-κB核转位的作用，部分成分有增加NF-κB核转位的效应趋势(表2)。以丹酚酸B盐为示例，显示图像结果。
结论：lumol/L和101umol/L的丹酚酸A、丹酚酸B预处理均能有效防止TNF诱导的肝细胞凋亡，其余成分(二氢丹参酮I，丹参酮IIA，丹参酮I，丹参素钠)无明显抗肝细胞凋亡作用。丹参各化学成分均无抑制TNF诱导的NF-κB核转位作用。
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