【摘 要】
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目的：研究miRNAs在Beclin-1基因介导细胞自噬进而出现骨肉瘤细胞化学抵抗中的作用及其机制.方法：利用qRT-PCR技术筛选出阿霉素抵抗的骨肉瘤细胞中表达水平显著改变的miRNAs.应用miRBase和TargetScan软件预测miR-30a的靶基因位点.荧光标记法检测miR-30a与Beclin-1基因结合位点及结合方式.Western blot技术检测骨肉瘤细胞Beclin-1、p6
【机 构】
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中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院骨科 100730 北京市 上海交通大学医学院附属仁济
【出 处】
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第十三届全国癌症康复与姑息医学大会
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目的：研究miRNAs在Beclin-1基因介导细胞自噬进而出现骨肉瘤细胞化学抵抗中的作用及其机制.方法：利用qRT-PCR技术筛选出阿霉素抵抗的骨肉瘤细胞中表达水平显著改变的miRNAs.应用miRBase和TargetScan软件预测miR-30a的靶基因位点.荧光标记法检测miR-30a与Beclin-1基因结合位点及结合方式.Western blot技术检测骨肉瘤细胞Beclin-1、p62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、cleaved caspase 3、total caspase 3、β-catenin表达水平.结果：化疗药物可以增高骨肉瘤细胞的自噬活性并降低miR-30a的表达水平.体内和体外试验表明miR-30a可降低Beclin-1介导的骨肉瘤细胞自噬行为进而增加骨肉瘤细胞的化疗敏感性.结论：miR-30a可通过降低骨肉瘤细胞自噬行为进而增加骨肉瘤细胞的化疗敏感性.
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