论文部分内容阅读
背景和目的 银屑病是临床常见的慢性炎症性皮肤病,主要是表皮受累。角质形成细胞,是表皮最主要的细胞类型,在炎症性皮肤病中发挥着重要的作用。目前学术界普遍认为角质形成细胞增殖过度、分化异常和炎症反应是银屑病发病机制方面的三个重要特征,其中角质形成细胞和免疫细胞之间的相互作用调节着银屑病中的皮肤炎症。虽然银屑病的治疗方式很多,但由于发病机制尚未完全明确,银屑病的临床治疗一直面临诸多困难。临床上现有的治疗方案毒副作用大。因此寻求性价比高、低毒性的治疗方法是银屑病治疗领域的热点。甘草酸苷(Glycyrrhizin,GL)是从甘草根部提取的三萜皂苷,有抗肿瘤、抗细胞增殖、抗氧化和清除自由基活性、抗血管生成、调节免疫应答等作用。甘草酸苷和它的衍生物成为近期治疗炎症性皮肤病的常规用药。然而,甘草酸苷对银屑病作用的分子机制细节尚不清楚。本研究旨在探讨甘草酸苷治疗银屑病的效果及其可能的治疗机制。方法 (1)首先用改良版的PASI评估甘草酸苷对咪喹莫特诱导的银屑病样动物模型的作用,病理活检证实其治疗效果,流式细胞术检测动物模型体内Th1/Th17亚群的比例和甘草酸酸对体外T细胞分化的影响,免疫组化法检测甘草酸苷对皮肤中ICAM-1表达的影响。(2)其次用TNF-d刺激人角质形成细胞株,建立银屑病皮肤炎症的体外细胞模型,采用CCK-8法、THP-1黏附实验、蛋白免疫印迹法检测甘草酸苷对HaCaT细胞活力的影响及HaCaT细胞表达ICAM-1的情况。(3)最后在细胞模型中,采用免疫印迹法检测甘草酸苷干预后,NF-κB、MAPK信号通路相关蛋白的表达。结果 (1)甘草酸苷干预后,小鼠咪喹莫特诱导的银屑病样皮损症状的出现时间推迟,PASI评分降低,病理结果好转,皮损区ICAM-1表达下降；体内实验和体外T细胞分化实验中,Th1/Th17亚群无明显区别。(2)体外实验显示甘草酸苷干预后,TNF-α诱导的HaCaT细胞ICAM-1表达显著减少,其对THP-1的黏附能力也显著降低。(3)甘草酸苷干预后,TNF-α诱导的HaCaT细胞胞浆内IKB α、胞核p65,总蛋白的pi-p65表达下降,pi-P38、pi-ERK1/2表达降低,pi-JNK无明显影响。结论 (1)甘草酸苷治疗可以抑制银屑病样皮损中ICAM-1的表达,有效治疗银屑病；(2)甘草酸苷的抗银屑病作用与其抑制炎症状态下角质形成细胞的ICAM-1表达和抑制单核巨噬细胞的黏附有关；(3)甘草酸苷的抗银屑病作用与抑制角质形成细胞NF-κB和ERK/P38 MAPK信号通路的活化有关；我们的发现可促使人们更深入的了解甘草酸苷治疗银屑病的分子机制,并可为银屑病的治疗提供参考。