【摘 要】
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为研究极端耐辐射球菌(Deinococcus radiodurans)中Dps (DNA protection during starvation)蛋白的生物学功能,利用体外三段连接和体内同源重组方法,成功获得dps 全基因(
【机 构】
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浙江大学原子核农业科学研究所农业部核农学重点开放实验室 杭州 310029
【出 处】
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2007两岸三地博士生NBIC学术论坛
论文部分内容阅读
为研究极端耐辐射球菌(Deinococcus radiodurans)中Dps (DNA protection during starvation)蛋白的生物学功能,利用体外三段连接和体内同源重组方法,成功获得dps 全基因(DRB0092)缺失突变株。不同剂量γ-射线辐照处理结果显示：与野生型R1相比,突变株在低剂量(≤2000Gy)条件下存活率显著下降,而高剂量(＞8000Gy)下则完全致死。通过体外基因克隆和大肠杆菌诱导表达,成功获得可溶性Dps蛋白。非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,交联处理后Dps蛋白在体外可形成稳定的多聚复合体。蛋白体外生化实验结果显示：Dps蛋白具有显著DNA结合功能,并能保护质粒DNA免受自由基攻击,其结合能力与蛋白浓度存在一定相关性。结果证明,Dps蛋白在耐辐射球菌抗氧化体系中发挥重要作用,可能对其极端抗性机制有特殊贡献。
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