【摘 要】
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[目的]为了明确鱼类肌肉中降解胶原蛋白的金属蛋白酶的酶学性质及其在肌肉软化中的作用.[方法]以鲢鱼为原料,以明胶酶谱为酶活测定方法,通过硫酸铵盐析,DEAE-Sephacel阴离子交换层析,Gelatin Sepharose 4B亲和层析以及Phenyl Sepharose疏水层析等方法,从肌肉中纯化降解明胶的金属蛋白酶(sMP),并对其酶学性质,胶原蛋白的降解,在贮藏中的活性变化等进行研究.[结
【机 构】
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福州大学生物和医药技术研究院,福建,福州,350002
【出 处】
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2016年中国水产学会水产品加工与综合利用分会学术年会
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[目的]为了明确鱼类肌肉中降解胶原蛋白的金属蛋白酶的酶学性质及其在肌肉软化中的作用.[方法]以鲢鱼为原料,以明胶酶谱为酶活测定方法,通过硫酸铵盐析,DEAE-Sephacel阴离子交换层析,Gelatin Sepharose 4B亲和层析以及Phenyl Sepharose疏水层析等方法,从肌肉中纯化降解明胶的金属蛋白酶(sMP),并对其酶学性质,胶原蛋白的降解,在贮藏中的活性变化等进行研究.[结果]该酶的分子量为72 kDa,最适温度和pH分别为40℃和8.0.EDTA,DTT,L-Cys和L-His几乎完全抑制酶的活性,Ca2+能够提高酶的活性,而高浓度的Zn2+却抑制酶的活性.质谱鉴定表明该酶属于基质金属蛋白酶-2.进一步研究发现,该酶在4℃下都能够有效地降解鲢鱼肌肉胶原蛋白,在鲢鱼肌肉4℃贮藏过程中其活性都保持稳定.[结论]本研究所纯化的蛋白酶属于基质金属蛋白酶-2,该酶可能是通过降解胶原蛋白而参与鱼死后肌肉的软化.
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