【摘 要】
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白念珠菌是人体最常见的一种条件性致病真菌.铁作为其生长和代谢过程中必需的营养元素,是影响其在宿主中环境中定殖、存活和致病过程的关键因素之一;同时,铁也能够作为调控信
【机 构】
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南开大学微生物学系、分子微生物学与技术教育部重点实验室
【出 处】
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第十一次全国基因功能与表观遗传调控学术研讨会
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白念珠菌是人体最常见的一种条件性致病真菌.铁作为其生长和代谢过程中必需的营养元素,是影响其在宿主中环境中定殖、存活和致病过程的关键因素之一;同时,铁也能够作为调控信号刺激白念珠菌对外界环境做出应答.铁在细胞内能与硫形成铁硫簇,在生命活动中起着至关重要的作用.在酿酒酵母中,Ssq1作为线粒体Hsp70家族的伴侣分子,参与铁硫簇蛋白的成熟过程,在铁稳态的调控方面发挥着重要作用.但是,关于Ssq1在白念珠菌胞内铁稳态的调控和铁硫簇合成方面的作用还未见报道.本研究发现,利用PCR介导的同源重组技术无法获得ssq1△/△菌株,因此采用Tet诱导表达系统构建Tet O-SSQ1诱导表达菌株,在此基础上研究Ssq1在白念珠菌生理代谢中的功能.结果表明,SSQ1基因被抑制后,菌株的生长受到明显的抑制;通过对胞内铁含量的测定发现,TetO-SSQ1诱导表达菌株胞内铁含量相对野生型菌株显著增加;Real-time PCR分析进一步表明,诱导表达菌株中铁转录因子AFT2,铁吸收相关基因FRE10、FET3、FTR1和CFL1表达均发生上调;此外,通过检测顺乌头酸酶的活性和蛋白表达量,发现SSQ1基因被抑制后顺乌头酸酶活性和表达量显著降低,铁硫簇蛋白合成受阻.上述结果表明Ssq1在白念珠菌胞内铁稳态的调控和铁硫簇合成过程中起着重要作用.
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