【摘 要】
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目的 已有研究发现单纯疱疹病毒1 (HSV-1)感染后,病毒的Us11蛋白在拮抗宿主先天性免疫反应中发挥重要作用.本文通过人工合成HSV-1的Us11基因,并克隆表达制备针对Us11的多克隆抗体,为进一步研究Us11的功能以及与宿主蛋白的相互作用提供有力的实验基础.方法 通过NCBI获得HSV-1的Us11基因序列,人工合成Us11基因;以合成的基因作为模板,设计一对特异性引物来扩增Us11片段;
【机 构】
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哈尔滨医科大学第一附属医院 上海市东方医院同济大学附属东方医院;哈尔滨医科大学第一附属医院
【出 处】
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中华医学峰会暨中华医学会神经病学分会第八届全国中青年神经病学学术会议
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目的 已有研究发现单纯疱疹病毒1 (HSV-1)感染后,病毒的Us11蛋白在拮抗宿主先天性免疫反应中发挥重要作用.本文通过人工合成HSV-1的Us11基因,并克隆表达制备针对Us11的多克隆抗体,为进一步研究Us11的功能以及与宿主蛋白的相互作用提供有力的实验基础.方法 通过NCBI获得HSV-1的Us11基因序列,人工合成Us11基因;以合成的基因作为模板,设计一对特异性引物来扩增Us11片段;回收Us11基因片段,克隆至原核表达载体pCold I(pCOLD-Us 11)和真核表达载体(pFLAG-Us11);利用pCOLD-Us11原核表达载体大量诱导表达Us11蛋白并纯化,纯化的Us11蛋白混合弗氏佐剂免疫新西兰大耳白兔制备Us11兔源多克隆抗体;转染pFLAG-Us11真核表达质粒至293T细胞,使用制备的Us11抗体对细胞表达的Us11蛋白进行间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(WB)检测.
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