【摘 要】
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目的 观察苯并(a)芘(Benzo (a) pyrene,B[a]P)对SD大鼠肺组织内细胞色素P4501A2(cytochrome P450 1A2,CYP1A2)和细胞色素P4502E1(cytochrome P4502E1,CYP2E1)基因表达的
【机 构】
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内蒙古医科大学药学院药理学教研室,内蒙古 呼和浩特 010110
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目的 观察苯并(a)芘(Benzo (a) pyrene,B[a]P)对SD大鼠肺组织内细胞色素P4501A2(cytochrome P450 1A2,CYP1A2)和细胞色素P4502E1(cytochrome P4502E1,CYP2E1)基因表达的影响.方法 (1)动物及给药方法：40只健康SD大鼠,♀♂各半,清洁级,200 ～250 g,随机分为B[a]P25 mg·kg-1、B[a]P50 mg·kg-1和B[a]P100mg·kg-1染毒组和空白对照组,每组10只.各染毒组B[a]P溶于橄榄油成均匀的混悬液,空白对照组给等体积的橄榄油,每日1次,连续灌胃14 d(染毒各组在d 14一次性腹腔注射各个剂量的B[a]P后),禁食不禁水24 h后断头放尽血液,剖胸迅速取出肺组织放入液氮中速冻,后迅速转移至-80℃冰箱保存备用(用于总RNA提取和基因表达分析).(2)大鼠肺组织RNA的提取：参照RNA提取试剂盒说明书方法提取大鼠肺总RNA,测定RNA溶液的吸光度(A260)和A260/A280以判断总RNA的浓度和纯度,甲醛变性琼脂糖凝胶电泳以判断RNA的完整性.(3)逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)：用RT-PCR反应试剂盒检测CYP1A2和CYP2E1基因mRNA的表达,以β-actin作为内对照,分析B[a]P对大鼠肺组织中CYP1 A2和CYP2E1基因mRNA表达的影响.结果 与空白对照组相比,高、中剂量的B[a]P组可显著影响肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因的表达,差异具有统计学意义(P＜0.05),而低剂量的B[a]P组与空白对照组比较差异无显著性(P＞0.05).结论一定剂量的B[a]P可显著影响肺组织内CYP1 A2和CYP2E1基因的表达,提示CYP1A2和CYP2E1基因可能参与B[a]P的代谢过程,催化B[a]P生成有毒的代谢产物,本研究对B[a]P相关的代谢酶的影响及B[a]P致癌机制的探讨具有一定的理论意义,为进一步探索B[a]P的致癌机理及与代谢酶相关基因的相互作用奠定一定的研究基础.
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