【摘 要】
：
吡嗪酰胺(PZA)是用于治疗结核病的一线药物,也是结核病疗法中唯一无法替换的药物.PZA常常与烟酰胺(INH)、乙胺丁醇片等联合用药,PZA可以使治疗结核病的疗程缩短9-12个月.结核分支杆菌rpsA是新发现的PZA的作用靶点,PZA与rpsA结合,抑制反式翻译过程.然而,rpsA的三维结构未被报道,该过程的分子机制尚不清楚.为了阐述PZA抑制反式翻译过程的分子机制及利用SAR-by-NMR设计新
【机 构】
：
厦门大学化学化工学院化学生物学系生物核磁共振实验室,厦门 361005
论文部分内容阅读
吡嗪酰胺(PZA)是用于治疗结核病的一线药物,也是结核病疗法中唯一无法替换的药物.PZA常常与烟酰胺(INH)、乙胺丁醇片等联合用药,PZA可以使治疗结核病的疗程缩短9-12个月.结核分支杆菌rpsA是新发现的PZA的作用靶点,PZA与rpsA结合,抑制反式翻译过程.然而,rpsA的三维结构未被报道,该过程的分子机制尚不清楚.为了阐述PZA抑制反式翻译过程的分子机制及利用SAR-by-NMR设计新型抗生素,我们使用E.coliBL21(DE3)/pET-28(a) 表达体系获得了rpsA(1-187)蛋白的可溶性表达,通过Ni-NTA亲和柱层析和FPLC分子筛层析,目的蛋白可以达到95％以上的纯度,产率为60mg/L.圆二色谱实验表明该蛋白有很好的二级结构,质谱图也表明该蛋白的均一性比较好.以上研究结果表明,我们获得了高产率,均一的目的蛋白,可以为下一步的结构与功能研究提供蛋白质样品.
其他文献
石英晶体微天平(QCM)技术应用于生物大分子相互作用的研究，具有操作简便、无需标记、实时在线检测等优点。我们使用N-(1-羧基-5-氨基戊基)亚氨基二乙酸(NTA)修饰经EDC/NHS活化的Attana？羧基传感芯片表面构建组氨酸标签蛋白俘获表面，所得表面固定容量高、蛋白结合稳定性好、再现性好且可再生重复使用，可用于蛋白质相互作用的研究，获得相互作用的动力学、亲和性和特异性等数据。此简便方法可以实
Polyoxometalates (POMs) are discrete early transition metal oxygen anion clusters.As an important inorganic drug candidates,POMs have shown promising antiviral,antibacterial and antitumor activities [
腺苷酸激酶(Adenylate kinase1,AK1)是生物体内普遍存在的一种单体酶,广泛存在于微生物、植物和动物体内.作为一种蛋白激酶,AK1 在生物体内处于低能量水平时催化AMP生成ADP,生成的ADP 通过氧化磷酸化生成体内能量的直接供应者ATP,以保障生命活动的正常运转.我们通过用NMR 技术研究AK1 的结构与动力学来理解AK1 的催化机制.2D1H-15N HSQC图谱显示我们制备的
Raf 激酶抑制蛋白(Raf-1 kinase inhibitor protein,RKIP)是一个转移抑制因子,在细胞增殖、细胞分化等生理过程中都发挥着重要的作用。作为一个双功能的抑制剂,RKIP可以交叉调控MAPK和GPCR信号通路,结合位点的转变是通过蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)对RKIP的153位丝氨酸的磷酸化完成的。为了阐明磷酸化对RKIP构象的影响,我们研究了