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本文建立了蜂王浆中氯霉素、磺胺类、磺胺增效剂、氟喹诺酮类、林可胺类、硝基咪唑类、大环内酯类等七大类27种药物残留的高效液相色谱-串联质谱的同时测定方法。对蜂王浆中药物残留的提取溶剂、提取pH值、色谱柱、流动相、质谱条件进行了优化选择。本方法以信噪比S/N=3对应浓度确定27种残留的检出限,氯霉素的检出限为0.1μg/kg,其余均匀为1μg/kg;氯霉素在线性范围0.3μG~10μg/kg,其余26种药残在线性范围2μg/Kg~100μg/kg内,回收率达70.1%~118.9%,相对标准偏差在4.3%~14.9%。该方法能满足蜂王浆中27种药物残留的同时测定要求,具有样品预处理简单、灵敏度高、分析时间短的优点。