【摘 要】
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目的 建立细胞共培养体系,探讨共培养的传代血管平滑肌细胞(SMCs)对内皮祖细胞(EPCs)吞噬ac-低密度脂蛋白(ac-LDL)能力的影响及意义.方法 应用含15％FBS、细胞生长因子100 μg/ml的DMEM/F12培养基培养EPCs,组织块法培养SMCs,分别应用DiL标记乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)与FITC标记荆豆凝集素I(FITC-UEA-1)荧光双染以及α-SM-ac
【机 构】
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成都军区昆明总医院细胞生物治疗中心、云南省干细胞工程实验室、云南省细胞治疗技术转化医学重点实验室、昆明市干细胞与再生医学重点实验室,昆明650032
【出 处】
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第十四届中国西部实验动物管理与学术交流会
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目的 建立细胞共培养体系,探讨共培养的传代血管平滑肌细胞(SMCs)对内皮祖细胞(EPCs)吞噬ac-低密度脂蛋白(ac-LDL)能力的影响及意义.方法 应用含15％FBS、细胞生长因子100 μg/ml的DMEM/F12培养基培养EPCs,组织块法培养SMCs,分别应用DiL标记乙酰化低密度脂蛋白(Dil-ac-LDL)与FITC标记荆豆凝集素I(FITC-UEA-1)荧光双染以及α-SM-actin免疫荧光,对EPCs和SMCs进行鉴定.以单纯EPCs作为对照,分别将第1、4、8及第16代SMCs与EPCs进行非接触或混合共培养,荧光显微镜观察EPCs吞噬Dil-ac-LDL能力,激光共聚焦显微镜拍照并使用ImageJ 1.48u图像分析软件进行细胞荧光强度分析.结果 在非接触性共培养系统,与对照相比,第1、4、8代SMCs对EPCs吞噬ac-LDL无明显影响,但是第16代SMCs却显著抑制其吞噬能力；在混合共培养系统,第1、16代SMCs均显著抑制EPCs吞噬ac-LDL(分别为P＜0.05与P＜0.01).结论 EPCs吞噬ac-LDL受SMCs传代培养以及接触方式的影响,合成型SMCs显著抑制EPCs吞噬ac-LDL,提示应用EPCs移植治疗损伤血管可能存在"时机窗",血管损伤后极早或过晚应用EPCs移植均可能达不到修复血管损伤的最佳治疗效果.
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