【摘 要】
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小RNA是一类非编码的RNA,在基因的转录后调节起到重要作用。长链脂酰COA合成酶1是在乳脂合成过程中的一个重要的酶。在前期研究,泌乳奶牛乳腺上皮细胞转录组对硬脂酸的应答实验中发现,miR-181a和ACSL1表达呈负相关,经过TargetScan和PicTar等生物信息学分析,ACSL1是miRNA的潜在靶基因。本研究的主要目的 是通过验证miRNA-181a和ACSL1之间的关系来确定miRN
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小RNA是一类非编码的RNA,在基因的转录后调节起到重要作用。长链脂酰COA合成酶1是在乳脂合成过程中的一个重要的酶。在前期研究,泌乳奶牛乳腺上皮细胞转录组对硬脂酸的应答实验中发现,miR-181a和ACSL1表达呈负相关,经过TargetScan和PicTar等生物信息学分析,ACSL1是miRNA的潜在靶基因。本研究的主要目的 是通过验证miRNA-181a和ACSL1之间的关系来确定miRNA-181a在乳脂肪合成中的功能。奶牛乳腺上皮细胞是从泌乳中期奶牛的乳腺中分离,并在含有10％的胎牛血清和催乳激素的培养基中培养。细胞转染miRNA-181a的过表达和抑制物,并培养48小时。结果 显示,过表达miRNA-1引a能够抑制ACSL1的表达,而沉默miRNA-181a能够增加ACSL1的表达。蛋白印迹试验在蛋白表达水平上也有类似的结果。油红O染色结果显示,当过表达miRNA-181a细胞中的脂肪生成减少,而抑制miRNA-181a的表达,能够增加脂滴的含量。而且过表达miRNA-181a较少了细胞内甘油三脂含量,抑制miRNA-181a表达能够增加甘油三脂的含量。因此,我们得出结论,miRNA-181a有可能通过靶向ACSL1来影响脂质生成。
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