复杂样品的高效分离与表征

来源 :第十届全国生物医药色谱及相关技术学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yweifeng
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在高效富集和表征方面,发展了一种新型亲水色谱固定相制备方法。利用离子相互作用原理,将带不同电荷硅胶与阳离子多糖结合,制备了新型涂覆纤维素的附聚型多糖色谱固定相,并在糖生物学和糖蛋白组学中都得到了很好的应用。采用带八个环氧基团的多面体寡聚倍半硅烷试剂POSS作为硅源,以聚乙烯亚胺作为交联剂,通过环氧-开环聚合反应成功地制备一种具有高度有序三维孔道结构的有机-硅胶杂化整体柱。在LC分离中不仅具有反相/亲水相互作用双保留能力,同时又具有很高的分离效率,最高柱效可达120,000N/m。设计了基于质量亏损的准等重二甲基化标记的定量方法;在MS1水平上两者的分子量接近等重,在MS2水平上利用碎片离子存在的5.84 mDa差异即可实现蛋白质组的相对定量分析。采用该方法,定量覆盖率可以达到99%以上;定量结果与理论值相对偏差低于2%;动态范围达到2个数量级此外,该方法可以扩展到高达6重样品的同时分析,显著提高了蛋白质组定量分析的通量。
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