【摘 要】
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目的：通过体外分离培养脂肪干细胞,并进行传代、表型鉴定及多向诱导分化,进一步了解其生物学特性,为临床运用奠定实验基础.方法：取SD大鼠附睾近心端,肾周及腹股沟韧带皮下脂肪组织,采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法,对脂肪干细胞进行分离、体外培养及扩增、表型鉴定及成骨成脂诱导分化,在倒置显微镜下观察原代及传代细胞形态变化,并采用MTT法检测第3、5、7、9代细胞增殖能力,用流式细胞仪检测细胞表面抗原
【出 处】
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浙江省中医药学会2017年骨伤科分会学术年会
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目的：通过体外分离培养脂肪干细胞,并进行传代、表型鉴定及多向诱导分化,进一步了解其生物学特性,为临床运用奠定实验基础.
方法：取SD大鼠附睾近心端,肾周及腹股沟韧带皮下脂肪组织,采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法,对脂肪干细胞进行分离、体外培养及扩增、表型鉴定及成骨成脂诱导分化,在倒置显微镜下观察原代及传代细胞形态变化,并采用MTT法检测第3、5、7、9代细胞增殖能力,用流式细胞仪检测细胞表面抗原标记,取第3代细胞进行成骨成脂诱导分化,并采用茜素红染色、油红0染色方法进行鉴定.
结果：采用密度梯度离心和贴壁培养相结合方法得到的脂肪干细胞,其细胞形态较为均一,基本呈长梭形,旋涡状生长,并形成集落样生长.MTT法检测第3、5、7、9代ADSCs呈典型的"S"形增殖曲线,符合干细胞的特性,脂肪干细胞表型鉴定结果显示CD29阳性高表达,CD34阴性表达,CD45低表达,CD105弱阳性表达,脂肪干细胞能向成骨细胞及脂肪细胞分化.
结论：脂肪干细胞取材较方便,含量丰富、并能够在体外分离培养,其稳定表达特异性的表面抗原,并且经过相应诱导培养后可向成骨及成脂多向分化,可作为优良的骨组织工程的种子细胞来源.
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