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牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea,BVD)是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)引起的一种极为复杂,呈多种临床类型表现的疾病,主要侵害牛、羊、鹿、牦牛等反刍动物以及猪的一种重要传染病.其临床症状主要包括呼吸综合症、先天性缺陷、免疫抑制、繁殖障碍、肠炎、免疫耐受与持续感染、急或慢性黏膜病、母畜流产、产死胎和畸形胎等.该病主要呈隐性感染,以持续感染和免疫耐受为主要特点,持续性的带毒、排毒使其成为常在的传染源,是造成BVDV广泛传播的重要因素.牛病毒性腹泻呈世界性的分布,广泛流行于南北美洲、欧洲、非洲、亚洲和大洋洲的许多养牛业发达的国家.本试验从血清/牛奶及分子流行病学着手,运用ELISA和RT-PCR方法对河南省BVDV的感染和流行情况进行调查.本次共调查9个地区,11个奶牛场和7个肉牛养殖场或养殖小区,采集血清样品432份,牛奶样品181份,粪便样品1209份.对不同地区奶牛场牛奶样品和肉牛场血清样品进行ELISA检测,所检奶牛场牛奶样品的BVDV总阳性率为58.6％ (106/181),血清样品的BVDV总阳性率为31.8％(124/395)；对不同地区牛场粪样和血清样品进行RT-PCR检测,所检牛场粪样的BVDV总阳性率为18.20％ (220/1209),血清样品的BVDV总阳性率为59.46％ (22/37).总的检测结果证实,河南省郑州地区、驻马店地区、济源地区、民权地区、灵宝地区的牛场中存在着较为严重的BVDV感染,本次所调查的牛只均未出现明显的临床症状.利用细胞培养技术对核酸扩增阳性样品进行病毒分离.共分到出两株：BVDV-MQ01、BVDV-MQ02,该病毒在细胞培养48h左右即出现细胞病变,特征为部分单层细胞呈拉网状、细胞死亡、脱落,死去的细胞漂浮在DMEM维持液中.基于5-UTR基因片段进行扩增和测序,应用MEGA5分析软件,选择N-J(Neighbor-Joining)方法绘制遗传进化树,这两株分离株均属于BVDV基因Ⅰ型,其中MQ01与BJ10 10 (bovine/China)、HUN0803(pig/China)、JN-1 (host？ /China)进化关系较为密切,MQ02与TJ06 (cattle/China)、IS26NCP/01(Japan)进化关系较为密切.核苷酸同源性分析比较得出,MQ01与BJ10 10的同源性最高为98.8％,亲缘关系最近,MQ02与TJ06的同源性最高为97.5％,亲缘关系最近.