【摘 要】
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本研究从已建立的抗沙门氏菌单抗中筛选出适用于肠炎沙门氏菌ELISA检验的3-47-26单抗,采用筛选强阳性杂交瘤细胞株制备了高效价的3-47-26单抗.改进了用辣根过氧化物酶标记高
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第五次会员代表大会暨第九次学术交流会
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本研究从已建立的抗沙门氏菌单抗中筛选出适用于肠炎沙门氏菌ELISA检验的3-47-26单抗,采用筛选强阳性杂交瘤细胞株制备了高效价的3-47-26单抗.改进了用辣根过氧化物酶标记高效价单抗的方法,进行了HRP标记单抗的免疫生物学特性的鉴定.确定了包被浓度和酶标抗体的工作浓度:HRP-3-47-26为l:100;LPS的包被浓度为400ng/ml.试验中采用LPS与多聚赖氨酸的结合,解决了包被过程中的解吸附作用,增强了包被的稳定性,同时也减少了假阳性反应,优化了包被过程.建立了检测肠炎沙门氏菌的抗原竞争ELISA方法,利用样品中的LPS抑制酶标抗体与包被的LPS结合,以降低底物反应的颜色从而达到检测的目的.通过对210份肠炎沙门氏菌感染鸡泄殖腔棉拭子、羽毛和组织样品先筛选后鉴定的方法进行检测具有明显的抑制作用,通过与国标法对大量的样品检测结果比较表明,竞争ELISA方法的检出率为18.09％;检出阳性样品36份,国标法检出率为17.14％;两者符合率为97.14％.竞争ELISA敏感性和特异性分别为94.4％和97.7％.从而为肠炎沙门氏菌的检测提供了一种敏感、特异的检测方法。
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