CaM与Cav1.2通道C末端不同片段结合的浓度依赖性及Ca2+依赖性研究

来源 :第九届海峡两岸心血管科学研讨会暨首届台湾南部国际心脑血管科学研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:warewell
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  目的 探讨在不同的钙调蛋白(CalmodulinCaM)(或突变体)浓度和[Ca2+]条件下,CaM(或突变体)与L-型钙通道CaV1.2 C末端(C-lobe)不同蛋白片段IQ、preIQ和preIQ-IQ(涵盖preIQ和IQ序列)相结合的情况.方法 大肠杆菌BL21表达GST-CaM(或突变体)、IQ、preIQ和preIQ-IQ的融合蛋白.GST Pull-down Assay分别观察IQ、preIQ、preIQ-IQ与CaM(或突变体)在不同[Ca2+]条件下的相互作用.SDS-PAGE凝胶电泳检测结果,SDS-PAGE胶上融合通道蛋白及CaM(或突变体)考马斯亮蓝染色,将电泳条带扫描数字化,Photoshop 7.0软件计算条带密度,并用BSA浓度-强度曲线为标准测定其浓度.SigmaPlot 10.0软件分析总量[CaM]-结合[CaM]的关系曲线.采用Students t检验,进行统计分析.
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