基于开管电色谱法表征单克隆抗体变体的研究

来源 :第21届全国色谱学术报告会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haofan555888
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
通过制备2种蛋白作为固定相的开管柱,应用开管电色谱法成功表征了单抗的电荷变体。首先选择牛血清白蛋白(BSA)作为固定相制备开管柱,通过层层自组装的方法制备了BSA修饰的涂层柱,并将其成功地应用于碱性蛋白的分离和单克隆抗体电荷异构体的分离。BSA涂层极大地改善了分辨率,有效地抑制了蛋白的吸附。此外,BSA涂层对单克隆抗体的电荷异构体表现了特殊的选择性。西妥昔单抗的七种不同形式的电荷异构体成功地获得分离,利妥昔单抗的两种碱性异构体和一种酸性异构体以及曲妥珠单抗的两种碱性电荷异构体和四种酸性异构体成功地从主峰中分离。牛血清白蛋白修饰的涂层柱表现了很好的重现性和稳定性。其次,根据凝血的机理一步法制备了纤维蛋白修饰开管柱,该开管柱也成功的应用于单抗电荷变体的表征,与BSA修饰开管柱相比,此柱制备更加简单,同时可成功应用于对单抗变体的表征。这些研究结果表明蛋白作为开管柱的固定相在对单抗电荷变体的表征方面具有一定的应用潜力。
其他文献
整体柱固定化酶反应器除了具有一般颗粒表面固定化酶反应器(IMER)的优点外,还克服了由于酶的非特异性结合,导致谱带展宽;在特定质量传递情况下,流速对底物转化效率的影响;扩散慢而
会议
2016年2月16日,接报到一瓶疑似有毒雪碧样品,据称:购买者饮用后发觉口感不对,并有医院消毒水的味道.之后出现头晕、头痛等不适症状.该样品呈淡黄色,闻之确有医院消毒水的味道
近年来,本课题组基于脲醛树脂材料及功能化脲醛树脂材料进行了一系列新型色谱整体固定相的开发,并将其应用到管内固相微萃取和毛细管电色谱之中。脲醛树脂因其具有制备条件温和
设计合成了一系列基于共价有机骨架材料的功能化材料并用于蛋白质高效酶解、磷酸肽以及糖肽选择性富集。利用其永久的多孔性和高比表面积的优势,各新型功能化共价有机骨架材料
亲水性液相色谱(HILIC)克服了传统正相色谱和反相色谱在极性化合物分离上的不足,是当前分离技术中的研究热点之一.近年来涉及HILIC的分离机理、制备方法及应用研究一直持续稳
会议
基于液质联用策略的单细胞蛋白质组学分析技术目前还没有很好实现.这一技术的难点主要分为三部分,一是与液质系统相匹配的单细胞预处理技术,包括单细胞抓取,裂解,酶解;二是色
会议
本研究基于微流控三维聚焦技术对样品液流的分布进行调控,力求利用聚焦液对样品的三维聚焦抑制样品的电喷雾进样损耗,并在相对较大的电喷雾尖端孔径下实现对纳升级流速微液流的
会议
会议
人体血清和唾液中的蛋白质已广泛用于临床检测,特别是癌症的筛查和诊断,但现有的体液蛋白标志物特异性不高.体液中含有大量的循环外泌体,往往携带与癌症相关的生物信号分子,
会议
构建了二元探针系统,首先通过探针1上的蛋白修饰亲和识别结合蛋白,然后利用探针1特有的DNA序列,将探针2通过DNA自组装靶向引导至结合蛋白,再引发光交联将结合蛋白键合到带有富集
会议