【摘 要】
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参照毕赤氏巴斯德酵母(Piehiapastoris)偏好密码子,改造并化学合成杂合抗菌肽cecA-mil基因,改造后的cecA-mil基因克隆到pPICZα-A载体中,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-
【机 构】
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南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095
【出 处】
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中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会
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参照毕赤氏巴斯德酵母(Piehiapastoris)偏好密码子,改造并化学合成杂合抗菌肽cecA-mil基因,改造后的cecA-mil基因克隆到pPICZα-A载体中,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-CM,转化Pichiapastoris受体菌X-33.在醇氧化酶(AOX)启动子调控下,分子量约1.9kD的cecA-mil杂合抗菌肽获得表达,经表达条件优化,重组酵母菌的摇瓶发酵产率可达到245μg/ml.抗菌特性研究表明,该表达产物具有广谱抗菌活性,对多数G-菌及G+菌均有较好的抑菌活性,特别是对氨苄青霉素抗性菌和卡那霉素抗性菌抑杀效果更好;具有热稳定性和酸稳定性.这些特点使得重组抗菌肽cecA-mil在食品防腐、疾病防治和动物饲料添加剂等方面显露出很好的应用前景。
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