论文部分内容阅读
硒是人体所必需的微量元素,缺硒和硒含量过高都会严重损害人体健康(硒在人体内的安全浓度范围为0.1-1 mg kg-1)[1].硒生理功能的正常发挥以及毒性与其形态及浓度密切相关.无机硒的毒性大于有机硒,相对于无机硒而言,有机硒中的硒代氨基酸如硒代胱氨酸(SeCys2)、硒代蛋氨酸(SeMet)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)等的生物可利用性更高[2].食品是人体摄入硒的主要来源,小麦等谷物中富含硒代蛋氨酸(SeMet),洋葱、大蒜等蔬菜中富含硒代胱氨酸(SeCys2)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)等[3].为了改善贫硒地区居民的硒摄入量,富硒酵母、硒盐等被用于缺硒地区居民的日常饮食中.因此,建立一种简单、快速、灵敏、准确的硒代氨基酸形态分析方法对于研究食品中的硒含量与疾病之间的相互关系以及硒抗癌作用机理等具有重要的意义.在实际样品分析中,由于食品样品基质复杂,且硒代氨基酸含量较低,在仪器分析前往往需要借助合适的样品前处理技术,以达到去除复杂基质,同时富集目标硒代氨基酸的目的 .本工作合成了氧化石墨烯包裹的四氧化三铁磁性纳米颗粒物(Fe3O4@GO MNPs),经Cu2+改性后,基于材料表面Cu2+与氨基酸分子中氨基和羧基的络合作用实现对目标硒代氨基酸的吸附.采用1 mL 0.1 mol L-1 乙二胺作为解吸剂,对吸附在材料表面的硒代氨基酸进行解吸.解吸液作为后续中空纤维膜液液液微萃取(HF-LLLME)的样品溶液,采用15％(v/v)甲基三辛基氯化铵([MTOA]+[Cl]-)-辛醇作为中间萃取溶剂,0.6 mol L-1 NaNO3 作为接受相溶液,实现了目标硒代氨基酸的二次富集.基于此,建立了磁固相萃取(MSPE)-HF-LLLME 双萃取技术与高效液相色谱(HPLC)-等离子体质谱(ICP-MS)联用分析生物样品中硒代氨基酸的新方法.经过MSPE 和HF-LLLME 两步富集,方法对四种目标硒代氨基酸的富集倍数在152-278倍之间,检出限在0.0075-0.013 ng mL-1 之间.为了验证方法的准确性,对富硒酵母标准物质(SELM-1)中的硒代氨基酸进行分析,硒代蛋氨酸的测定值和标准值吻合良好.最后,将所建立的方法用于大米和富硒酵母细胞中硒代氨基酸的分析,结果满意.