【摘 要】
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[目的]研究采用免疫磁富集(IMS)的方法结合环介导基因恒温扩增技术快速检测副溶血性弧菌，并比较研究了不同化学键偶联的免疫磁珠的捕获能力.[方法]根据副溶血性弧菌的菌体
【机 构】
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上海海洋大学食品学院,上海201306
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[目的]研究采用免疫磁富集(IMS)的方法结合环介导基因恒温扩增技术快速检测副溶血性弧菌，并比较研究了不同化学键偶联的免疫磁珠的捕获能力.[方法]根据副溶血性弧菌的菌体表面抗原合成多克隆抗体，并将其与羧基和甲苯磺酰基包被的磁珠结合制备高效的免疫磁珠来捕获目的菌.采用环介导的基因恒温扩增技术针对副溶血性弧菌的tlh基因设计3对引物，在1h内完成检测.[结果]在起始菌液浓度为4.3210gCFU/ml时，羧基偶联的磁珠捕获菌体的能力比甲苯磺酰胺基偶联的磁珠能力强(P＜0.05)，分别为79％和94％.LAMP检测结果表明，免疫富集对LAMP没有抑制剂的作用，且能有效的提高DNA提取效率，增加LAMP反应灵敏度.[结论]本研究建立了IMS-LAMP方法快速检测副溶血性弧菌，期望能将其应用于水产品中副溶血性弧菌的快速检测.同时分析比较了不同化学连接键偶联磁珠捕获能力，以期为IMBs的选择提供帮助.
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