【摘 要】
：
[目的]家蚕丝蛋白的合成具有高效特异性,到目前为止,该机制还未被完全阐释.目前研究结果表明这一特性主要通过转录水平实现的.Bmsage和Bmdimm是通过基因芯片新发现的一类含HLH结构域的丝腺特异转录因子,它们是否参与及如何参与丝蛋白的转录调控还未见报道.[方法]本研究通过RT-PCR、荧光定量PCR、westhern blot、荧光免疫组化、EMSA、Far-westhern、RNAi等方法研
【机 构】
：
家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆,400716;重庆市蚕丝纤维新材料工程技术中心,重庆,400716
论文部分内容阅读
[目的]家蚕丝蛋白的合成具有高效特异性,到目前为止,该机制还未被完全阐释.目前研究结果表明这一特性主要通过转录水平实现的.Bmsage和Bmdimm是通过基因芯片新发现的一类含HLH结构域的丝腺特异转录因子,它们是否参与及如何参与丝蛋白的转录调控还未见报道.[方法]本研究通过RT-PCR、荧光定量PCR、westhern blot、荧光免疫组化、EMSA、Far-westhern、RNAi等方法研究Bmsage和Bmdimm基因参与丝蛋白重链基因(fib-H)的调控方式.[结果]Bmsage和Bmdimm无论是在转录水平还是蛋白水平都在丝腺组织特异表达,而且,其表达量与fib-H及茧丝量成正相关关系.Bmsage和SGF1蛋白形成复合物,通过SGF1结合到丝素重链基因fib-H)A和B位点上间接对其进行调控.Bmdimm通过fib-H上游的E-box(CAAATG)位点直接调控fib-H基因的表达.Bmdimm除了与CAAATG元件结合外还可以与CAATTG、CAACTG其它几种形式的E-box结合.同时,通过突变实验证明Bmdimm碱性区域保守的第113位精氨酸是结合E-box元件的关键位点.对其信号通路进行研究发现,Bmdimm受保幼激素(JH)通路的Kr-h的调控.[结论]Bmsage和Bmdimm分别通过间接和直接的方式参与fib-H基因的表达调控,进而调控丝蛋白的合成.
其他文献
[目的]诱导表达中华蜜蜂(Apis cerana cerana)化学感受蛋白CSP1重组蛋白,研究其与新烟碱类农药吡虫啉的结合特性、结合过程中关键氨基酸位点并阐释详细作用机理,以及对β-紫罗兰酮的结合影响.[方法]pET-32a(+)作为原核表达载体,利用BL21(DE3)大肠杆菌感受态细胞,诱导获得CSP1重组蛋白.利用多重分子荧光光谱法,分为2组实验,首先分别于284 K、294 K条件下用1
翻译调节肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP),是一个在物种间广谱表达、结构保守的亲水性蛋白,广泛存在于真核生物包括酵母、真菌、哺乳动物、昆虫、植物中.目前研究表明,TCTP具有调节细胞骨架动态变化、细胞生长、增值和凋亡、保护细胞免受多种应激损伤等多种功能.TCTP的功能研究大部分集中在模式物种果蝇及人类的生理和病理过程中,在其它昆虫
家蚕是具有重要经济价值的驯化昆虫,其饲养过程中面临多种病害威胁。家蚕核型多角体病毒(BmNPV)是对养蚕业危害最严重的一类病原,培育抗病品种是应对蚕病威胁最经济有效的手段。但是,蚕体强健性和茧丝性状间的负相关问题等已经成为传统育种技术至今仍难以逾越的障碍,转基因技术则有望突破传统育种方法的这些瓶颈。在我们的研究中,首先建立了家蚕抗性检测平台,单头添食保证每头蚕食下病原量一致,避免因个体食下病原量不
家蚕蚕雏翅突变品系是一种翅膀发育缺陷个体。本实验利用家蚕雏翅突变品系U11与野生型品系P50,对家蚕雏翅基因(minute wing,mw)进行精确定位。以家蚕雏翅突变品系U11与野生型品系P50为亲本,获得回交群体BC1F和BC1M,以回交群体为材料,提取总DNA和总RNA,利用STS分子标记技术对雏翅突变基因进行定位分析,并利用CRISPA/Cas9技术对候选基因进行功能性鉴定。通过STS标记
黑肩绿盲蝽是水稻害虫飞虱和叶蝉的重要天敌，为了从传统中草药中开发其引诱剂，利用其捕食作用控制飞虱和叶蝉的为害，本研究利用乙醇浸提法获得夹竹桃、高良姜等9种中草药植物精油.在室内利用Y型嗅觉仪和H型管测定这些精油对黑肩绿盲蝽的引诱作用，结果发现人心果、夹竹桃和香菜精油对黑肩绿盲蝽若蝽和成蝽均具有显著的引诱作用.通过极性分离、GC-MS测定这3种植物精油的化学组成，并从中挑选10种化合物，测定这些化合
鳞翅目昆虫家蚕是研究先天免疫的一种很好的模式生物，卡路里限制对于免疫系统具有有益的影响。在该研究中，利用模式昆虫家蚕，研究了卡路里限制对于家蚕免疫系统的影响。结果 表明，卡路里限制能够显著地增加感染金黄色葡萄球菌家蚕的存活率，对感染其他微生物，如大肠杆菌，家蚕核型多角体病毒家蚕的存活率，影响不显著。对于卡路里限制的家蚕感染金黄色葡萄球菌的研究发现，家蚕血细胞的吞噬增强，转录组测序结果也表明与吞噬相
家蚕杆状病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是能够自身编码泛素基因的杆状病毒属病毒成员,而泛素-蛋白酶体系统在BmNPV的早期复制过程中扮演了重要角色,所以在BmNPV侵染过程中,病毒及宿主泛素化蛋白的鉴定对于研究泛素-蛋白酶体系统在病毒复制中所起得作用显得尤为重要。本研究借助Red重组系统缺失掉家蚕杆状病毒编码的泛素基因,再通过杆状病毒表达系统构建
[目的]家蚕缩蚕突变体(contraction,cot)是家蚕少有的行为突变体之一,缩蚕幼虫突变表型为幼虫身体粗短,手碰触后即强度收缩,翻倒,吐消化液,一时不能行动.遗传分析表明该性状由单基因控制,呈隐性遗传,其突变基因被定位于第15连锁群的25.0位点,但其对应的突变基因及突变机理一直未被克隆和揭示.[方法]本研究通过定位克隆、western blot、荧光免疫组化、RNAi、转录组及蛋白质组学