【摘 要】
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本研究建立了转基因耐除草剂大豆A2704-12转化体特异的高通量、低成本的检测方法.根据A2704-12转化体外源插入片段5端旁侧序列与大豆基因组连接区序列设计特异性检测引物,利
【机 构】
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农业部转基因生物产品成分监督检验测试中心(合肥)/安徽省农业科学院水稻研究所,安徽合肥230031农业部转基因生物产品成分监督检验测试中心(合肥)/安徽省农业科学院水稻研究所,安徽合肥230031;安
【出 处】
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安徽省农学会、安徽省作物学会2014年联合学术年会
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本研究建立了转基因耐除草剂大豆A2704-12转化体特异的高通量、低成本的检测方法.根据A2704-12转化体外源插入片段5端旁侧序列与大豆基因组连接区序列设计特异性检测引物,利用该引物对同时建立耐除草剂大豆A2704-12普通PCR和实时荧光PCR的转化体特异性检测方法,目的片段大小为239bp.结果显示:建立的转化体特异性检测方法可将耐除草剂大豆A2704-12和其他转基因大豆准确区分;普通PCR的检测灵敏度为0.05％,实时荧光PCR的检测灵敏度为0.01％.采用DNA高通量提取法进行大豆的DNA提取,利用相同引物建立A2704-12转化体的普通PCR和实时荧光PCR检测方法,并在后者中选用成本较低的SYBR Green Ⅰ染料法.因此,利用本研究建立的耐除草剂大豆A2704-12检测方法,不仅检测结果特异性强、灵敏度高,而且检测通量高、检测成本较低,适宜于目前转基因生物产品的市场监管需求,具有重要的应用价值.
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