【摘 要】
：
诱导性多能干细胞(IPS细胞)重编程研究中,如何选用来源便捷、数目充足的成熟体细胞为重编程靶细胞是当今IPS领域的热点之一.具备上述选材条件的外周血成熟T淋巴细胞却存
【机 构】
：
上海第二军医大学基础部细胞生物学教研室,上海 200433
【出 处】
：
中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议
论文部分内容阅读
诱导性多能干细胞(IPS细胞)重编程研究中,如何选用来源便捷、数目充足的成熟体细胞为重编程靶细胞是当今IPS领域的热点之一.具备上述选材条件的外周血成熟T淋巴细胞却存在体外成活时间短和病毒转导效率极低等技术难题.目的 本研究旨在建立适合小鼠成熟活化T淋巴细胞体外长时间培养以及慢病毒转导的技术平台.方法 采用Ficoll梯度离心法分离小鼠外周血单个核细胞,分别用刀豆蛋白A(ConA)和Anti-CD3等方法活化T淋巴细胞,流式细胞法检测T细胞表面CD3+CD44highCD62Llow等活化标志,羧基荧光素双乙酸盐-琥珀酰亚胺酯(CFSE)示踪活化细胞分裂,超离纯化的GFP重组慢病毒直接转导上述T淋巴细胞.结果 发现：可从3月龄的雌性Balb/c小鼠(SPF级)1ml外周血中分离到约2×106单个核细胞；96孔"U"型板经Anti-CD3、Anti-CD28(终浓度分别为2μg/ml、4μg/ml)包被后,可使2.0×105个细胞/孔在第三天(D3)迅速增殖至1.6×106个细胞/孑孔,活化T淋巴细胞占CD3+细胞总数的78.34％,且CFSE强阳性细胞由原来90.20％降至16.34％,该活化T淋巴细胞在含IL2(终浓度30ng/ml)CTL培养基中维持生长(D14后细胞数为1.5×106个细胞/孔)；经纯化GFP重组慢病毒转导上述T淋巴细胞3d后,GFP阳性率达35.41％.有关进一步提高慢病毒对该T淋巴细胞转导效率的研究目前仍在进行中.结论 该技术体系的建立将为下一步用肝特异性转录因子共转导成熟T淋巴细胞以直接筛选出重编程的肝细胞创造了条件.
其他文献
高校学生党支部实践创新,关键在“对标”,重点在“法治”,核心在抓住主要矛盾,坚持政治建党标准、坚持教育强国战略、坚持立德树人理念.采取“分步走”策略,通过狠抓实支部“
春节是中华民族的第一大节,它在中国文明史上有着重要的地位.悠久的历史使其保存了传统的农业社会的文化风俗,但随着时代的变迁和社会的发展,传统的春节习俗发生了变革.文章
归化/异化在翻译的过程中有着重要的地位.因为这对矛盾的统一体涉及两种语言的文化诠释.本文试图从研究的价值、研究的现状和研究的可能性去解释读后续译对归化/异化翻译能力
目的 为了探讨健康供者体内应用rhG-CSF动员对NK细胞的影响.方法 利用四色/三色免疫荧光标记技术及细胞毒性实验方法研究了rhG-CSF体内应用前后骨髓及外周血采集物中NK细
心理学是一门抽象的学科,理解起来较为生涩,因此在教学过程中引入案例教学法对帮助学生理解是非常有必要的.案例教学法能直观的帮助学生掌握知识,夯实理论基础,提升实践能力.
在高中英语教学实践中,一个高效而又充满趣味性的英语教学课堂可以打开学生紧闭的心扉,让学生主动进行英语知识的探索与学习,从而能够让学生取得一个较好的英语成绩,并不断增
细胞重编程中,外界信号(转录因子等)通过改变组织特异性基因和全能性相关基因区域的表观遗传修饰,对特定基因的表达进行时空精确调控,改变了细胞的命运决定,最终把终末分
纯钛种植支抗在正畸中已经被广泛应用。种植支抗的早期负重十分重要,他可以缩短正畸时间,但是相对也会增加支抗脱落的风险,因为此时骨整合尚不完善。钛合金由于具有更好
再生医学是一个具有巨大潜力的新兴领域。人类的再生力量有限，但自然界中许多动物可以再生其器官，让我们可以从中学习不同的再生策略，再应用到再生医学上。这里我们讨论再生
目的探讨大气污染对学龄前儿童DNA损伤的影响。方法分别于2014年11月30日和2015年6月30日在长沙市和海口市两地各采集50位学龄前儿童口颊细胞进行微核试验,分析其微核率。并