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目的:建立大鼠血浆中三种蟾蜍甾烯类化合物蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基的分析方法,并用于其在大鼠体内的药代动力学研究。方法:大鼠按0.8mg·kg-1 由尾静脉注射蟾酥提取物后分别于 2,5,10,15,20,30,45,60 及90 min 眼眶取血,采用乙腈沉蛋白与液液萃取相结合方法进行血浆样品预处理,以 HPLC 方法测定大鼠血浆中蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基的浓度,以Kinetica 软件拟合药动学参数。结果:建立的HPLC 方法,蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基均得到很好的分离,重现性、精密度、线性系良好,达到体内分析要求;经非房室模型拟合,得到了蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基在大鼠体内主要药动学参数。结论:本文建立的蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基血药浓度测定方法及所获得的药动学参数,可为中药蟾酥提取物的药代动力学研究提供参考。