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目的:从离体和在体水平,通过抑制DNA甲基化酶观察A549细胞辐射反应中miR-9表达水平及其调控作用,探讨miR-9增强肺癌辐射敏感性及其DNA甲基化调控之间的关系.方法 :利用生物辐照仪(美国产X-RAD 320iX)进行照射,细胞单次吸收剂量为10 Gy,荷瘤裸鼠局部照射剂量为20 Gy.采用分子生物学和细胞生物学方法建立高表达miR-9的细胞模型(miR-9 high-A549)和构建shRNA-DNMT1表达质粒;分别采用MTT、流式细胞术、划痕实验和real time PCR法检测受照前、后A549和miR-9high-A549细胞的活性、凋亡、迁移以及miR-9表达水平,再用DNA甲基化酶抑制剂(5-aza-CdR)和DNA甲基转移酶干扰质粒(shRNA-DNMT1)作用于受照前、后A549和miR-9 high-A549细胞,分别采用bisulfate sequencing PCR和real time PCR法检测miR-9启动子区域甲基化状态以及miR-9和DNMT1表达水平.