【摘 要】
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目的：检测microRNA-205在乳腺细胞株与乳腺疾病组织标本中的表达；筛选microRNA-205可能调控的基因.方法：12个乳腺细胞株,包括正常与低度恶性的MCF10A、MCF12A、BT474、MCF7
【机 构】
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330006 南昌,南昌大学基础医学院
【出 处】
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全国肿瘤病因学和肿瘤流行病学学术会议
论文部分内容阅读
目的：检测microRNA-205在乳腺细胞株与乳腺疾病组织标本中的表达；筛选microRNA-205可能调控的基因.方法：12个乳腺细胞株,包括正常与低度恶性的MCF10A、MCF12A、BT474、MCF7、MDA-MB-468、SK-BR3、T-47D、ZR-75-1以及高度恶性的BT549、HS578T、MDA-MB-231、SUM159PT进行miRNA表达谱生物芯片分析,获得差异表达的miRNAs并选择实时定量RT-PCR对差异表达的microRNA-205进行验证；原位杂交方法分析乳腺疾病组织标本中microRNA-205的表达；cDNA表达谱生物芯片对microRNA-205 mimic 转染的BT549、HS578T、MDA-MB-231、SUM159PT细胞株进行mRNA表达谱分析；生物信息学分析筛选microRNA-205可能调控的基因.结果：在正常、低度恶性与高度恶性的乳腺细胞株中,44个microRNA存在差异表达(p＜0.01).与低迁移组相比,30个miRNA在高迁移组中下调,14个miRNA在高迁移组中上调；实时定量RT-PCR结果显示,高度恶性的4个乳腺癌细胞株中microRNA-205的表达均低于正常与低度恶性的8个细胞株(p＜0.05)；原位杂交结果显示,microRNA-205在乳腺癌中的表达低于正常乳腺与良性乳腺病变(p=0.011),而与乳腺癌TNM分期、临床分期无相关性(p＞0.05)； cDNA表达谱生物芯片分析显示,与对照组比较,microRNA-205 mimic转染的BT549、HS578T、MDA-MB-231、SUM159PT细胞株中分别有1305、669、1186、765个基因下调(倍数值≥1.25),包括在任意3个转染细胞株中的共下调基因86个.结合生物信息学分析软件TargetScan,筛选出5个microRNA-205调控基因.结论：microRNA-205可能参与乳腺癌病变的发生、发展；结合生物信息学分析手段,高通量筛选microRNA-205调控的基因网络,为后续microRNA-205的机制研究提供了明确的方向.
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