【摘 要】
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构建具备NAD+/NADh再生能力的双重组菌耦合体系(表达甲酸脱氢酶的E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-fdh和表达醇脱氢酶的E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-adh),分别研究了两者的培养条件、前者的高细胞密度培养以及后者的分离纯化。重组菌E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-fdh优化后的发酵培养基为:Na2hPO4·7h2O
【机 构】
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浙江大学化学工程与生物工程学系生物工程研究所,杭州 310027 浙江大学化学工程与生物工程学系,
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构建具备NAD+/NADh再生能力的双重组菌耦合体系(表达甲酸脱氢酶的E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-fdh和表达醇脱氢酶的E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-adh),分别研究了两者的培养条件、前者的高细胞密度培养以及后者的分离纯化。重组菌E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-fdh优化后的发酵培养基为:Na2hPO4·7h2O 13 g.L-1,NaCl 0.5 g.L-1L,Kh2PO4 3 g.L-1,Nh4Cl 3.5 g.L-1，MgSO4 0.2 g.L-1,葡萄糖10 g.L-1,微量元素2 ml.L-1。重组菌E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-fdh高密度培养研究发现,以葡萄糖浓度为指标的分批补料,发酵液的OD600值达到83,酶活为11.9 U.ml-1；而以pH为指标的ph-stat法葡萄糖流加方式补料,发酵液的菌体密度有所提高，OD600达到98,酶活为12.1 U.ml-1。重组菌E. Coli BL21(DE3)/pET 28a(+)-adh粗酶液经Ni-NTA Agarose亲和层析、Sephedex G-25 medium凝胶过滤和冷冻干燥得到纯酶Adh,比酶活提高5.62倍,为6.57 U.mg-1。
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通过筛选,得到了一种用于非均相催化一步合成碳酸二苯酯(DPC)所需的载体(Ce1-xMnxO2),以PdCl2为活性钯源,通过沉淀法负载活性组分,制备出0.5％Pd/Ce1-xMnxO2催化剂。采用XRD、SEM、BET等手段对载体及催化剂进行了表征。考察了载体制备方法、金属离子配比及载体焙烧温度对催化剂活性的影响。研究结果表明,采用溶胶-凝胶法,并且Ce:Mn摩尔比为1:1,载体在600℃下焙烧
采用无水AlCl3催化剂,进行了桥式四氢双环戊二烯异构化合成挂式四氢双环戊二烯反应的反应机理与动力学模型研究。考察了溶剂种类、溶剂比、反应温度对反应转化率的影响,获取了最优反应条件。分析了异构化反应过程机理,在排除内外扩散的影响下,建立了该过程反应的本征动力学模型。研究结果表明:该反应为一级反应,其反应活化能为116/kJ mol,指前因子为3.39×1013。最后,通过剂料比、催化剂用量等参数对
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本文研究了以Fe2(SO4)3/TEA/NaOH为媒质体系间接电化学还原靛蓝的工艺条件及动力学。采用恒流法还原靛蓝,以在线光谱仪监测反应过程,探讨不同反应条件对还原的影响。研究结果表明,当还原靛蓝浓度为0.02g·L-1时,最佳反应条件为:电流密度3mA·cm-2，Fe2(SO4)3浓度0.004mol·L-1,温度50℃,pH值14,TEA浓度0.15 mol·L-1。当满足一定的电流密度和媒质
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