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肝窦内皮细胞(LSEC)是肝常驻抗原提呈细胞,可摄取门静脉血中的抗原物质,诱导肝乃至全身的特异性免疫耐受.肿瘤来源的外泌体含肿瘤特异或相关性抗原,具有刺激免疫应答和诱导免疫耐受的双重作用.由于外泌体尺寸很小,以往研究缺少用成像的方法直接观察外泌体与LSEC的相互作用,对此,本研究采用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)对外泌体与LSEC间的作用进行显微成像,直观研究体外和体内环境下LSEC对肿瘤来源外泌体的摄取.最终成功分离出小鼠LSEC，从小鼠结肠癌CT26.WT细胞培养液中分离出外泌体。建立了荧光染料DiI标记外泌体的方法。在体外直接观察到LSEC对外泌体的快速摄取。通过自小鼠尾静脉注射Exo-DiI，在CLSM下观察到LSEC对肝血窦中外泌体的快速摄取。成功构建了CT26-DsRed/EGFP-Ex。转基因细胞，建立了小鼠原位荷CT26-DsRed/EGFP-Ex。结肠癌模型，应用CLSM直接观察到了肿瘤释放外泌体到肿瘤间质，进入门静脉血中，循门脉血流到达肝脏，被LSEC所摄取。本研究成果为进一步研究LSEC通过摄取肿瘤来源外泌体诱导肿瘤免疫耐受以及促进结肠癌肝转移奠定了基础。