猪流感病毒神经氨酸酶基因(N1和N2)在昆虫细胞中的表达

• 作 者: 万春和[1]刘明[2]刘春国[2]杨涛[2]
• 机 构: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 农业部动物流感重点开放实验室/ 兽医生物技术国家重点实验室， 黑龙江 哈尔滨 150001；福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福建 福州 350013
• 出 处: 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
• 发表日期: 2008年期

根据GenBank发表的N1和N2亚型猪流感NA基因序列设计引物，扩增出NA基因片段，将其克隆到pFastBacGP67A和pFastBacGP67C杆状病毒载体上，筛选阳性重组转座载体pFastBacGP67A-N1和pFastBacGP67C-N2，转化含有杆状病毒穿梭载体(Bacmid)的DH10Bac感受态细胞，构建杆状病毒表达载体获得重组转座子rBacmid-N1和rBacmid-N2，在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒rBv-N1和rBv-N2，再感染细胞，收获目的蛋白。通过SDS-PAGE蛋白电泳、免疫印迹法、免疫组化分析表明该蛋白得到表达，且具有良好的生物学活性。