【摘 要】
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目的：证明一氧化氮(NO)/cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)对血管平滑肌细胞三磷酸肌醇受体(IP3R)Ⅰ型的表达以及细胞内游离钙水平的调节. 方法与结果：比色法(MTT法)测定血管平滑肌细
【机 构】
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北京大学人民医院心内科,北京,100044
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目的：证明一氧化氮(NO)/cGMP依赖性蛋白激酶(PKG)对血管平滑肌细胞三磷酸肌醇受体(IP3R)Ⅰ型的表达以及细胞内游离钙水平的调节.
方法与结果：比色法(MTT法)测定血管平滑肌细胞的增殖.激光共聚焦显微镜(confocal)测定细胞内游离钙离子浓度.逆转录PCR(RT-PCR)以及免疫印迹(Westernblot)测定IP3RI的表达水平.
结果显示SNAP和Sp8-pCP-cGMPS抑制血管平滑肌细胞(SMCs)增殖,但Rp-8-pCPT-cGMPS促进SMCs增殖.而且SNAP和Sp-8-pCPT-cGMPS可以进一步抑制经维拉帕米(Ver)预处理后的SMCs增殖.Ver抑制PE刺激的细胞内游离钙离子浓度升高,这一抑制作用能够被SNAP和Sp-8-pCPT-cGMPS进一步加强,但可被Rp-8-pCP-cGMPS减轻.IP3RImRNA转录与蛋白质表达被SNAP和Sp8-pCPT-cGMPS降低,但被Rp-8-pCPT-cGMPS增加.
结论：NO/PKG在转录水平和翻译水平抑制血管平滑肌细胞IP3RⅠ表达,进而参与对细胞内游离钙离子浓度的调节。
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