论文部分内容阅读
为筛选亚健康便秘人群结肠粘膜进展的分子标志物,探讨亚健康便秘人群的结肠粘膜改变机制提供理论依据.采用双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)对亚健康便秘人群及健康志愿者结肠粘膜组织进行蛋白质分离,ImageMaster 2D Elite分析软件进行图像分析,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization time ofi flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质指纹图(peptide mass fingerprint,PMF),搜索数据库鉴定差异蛋白质,建立了亚健康便秘人群及健康志愿者结肠粘膜组织2 DE图谱及其凝胶的平均蛋白质点数(501.00±37.16, 536.00±41.63),两者平均差异蛋白质点数为46 00±7.82,取20个表达量明显改变的蛋白质点进行质谱分析,鉴定出1 7个蛋白质.其中7个蛋白点表达发生下调,10个蛋白点表达发生上调.差异蛋白质点包括蛋白质合成与分解、分子伴侣、氧化还原调节及信号传导等相关蛋白质.随即应用免疫印迹(Western blot)技术分析差异蛋白质β-actin、YWHAZ及PBP-Ⅰ (phosphat idylethanolamine-binding protein Ⅰ)在两类组织中的表达水平及临床意义.结果表明亚健康便秘人群和健康志愿者的结肠黏膜组织蛋白质表达存在差异,β-actin、YWHAZ表达下调及PBP-Ⅰ上调参与了亚健康便秘的发生,对此状态进行合理干预,可使身体向健康转化.