【摘 要】
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为研究猪瘟SM强毒株和HCLV株E2蛋白主要抗原结构域在分子水平和免疫水平上的差异.用PCR技术从重组质粒分别扩增了SM株和HCLV株E2基因的主要抗原结构域ABCD和C片段,分别克隆于pMAL-p2X载体中,经PCR和测序鉴定,E2基因的2个主要抗原结构域片段的位置、大小和读码框均正确.将构建的重组质粒转化到表达菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和
【机 构】
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中国兽医药品监察所,国家猪瘟参考实验室,北京,100081
【出 处】
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中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2006年学术年会
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为研究猪瘟SM强毒株和HCLV株E2蛋白主要抗原结构域在分子水平和免疫水平上的差异.用PCR技术从重组质粒分别扩增了SM株和HCLV株E2基因的主要抗原结构域ABCD和C片段,分别克隆于pMAL-p2X载体中,经PCR和测序鉴定,E2基因的2个主要抗原结构域片段的位置、大小和读码框均正确.将构建的重组质粒转化到表达菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析.SM株和HCLV株E2基因的2个主要抗原结构域片段均可在表达菌中表达,表达形式为包涵体.免疫印迹结果表明,SM强毒阳性血清和CSFV E2单抗与SME2-ABCD、CE2-ABCD、SME2-C、CE2-C发生反应;HCLV毒阳性血清只与CE2-ABCD、CE2-C发生阳性反应.HCLV株和SM株E2蛋白的抗原结构域中的ABCD和C片段在分子结构上和免疫水平上存在差异,761G(SM)→K(HCLV)是影响CSFV强弱毒抗原差异的关键位点.
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