常压室温等离子体(ARTP)微生物基因组快速突变方法及其应用研究

• 作 者: 邢新会[1]王立言[1]金丽华[1]葛楠[2]方明月[1]张雪[1]陈韵亿[1]乐沛思[2]李果[2]黄子亮[1]张翀[1]蒋培霞[1]李和平[2]
• 机 构: 清华大学 化工系,100084
• 出 处: 2012工业生物过程优化与控制研讨会
• 发表日期: 2012年期

　　本研究利用自主研发的ARTP技术和仪器，对微生物突变机理进行了不同层次的解析，建立了对真菌、细菌等各种微生物菌株进行了快速突变的操作平台，结果显示该方法能够对微生物基因组突变具有快速、多样、突变库容大、突变遗传稳定性高等特点。其中在阿维链霉菌的ARTP突变中，菌株的总突变率约为30％，正突变率达到21％。其中一株突变株G1-1遗传稳定性高，不仅在Bla与阿维菌素的总产量比野生菌株各提高了40％和18％，而且总阿维菌素中的Bla含量达到47.8％，高于野生菌株的39.1％。这些结果表明突变株在代谢网络上发生了显著的变化。到目前为止，ARTP已成功地用于甲烷氧化菌，产气肠杆菌，酵母和微藻等30余种微生物的快速突变，筛选出了表型变化显著的突变株，并建立了突变库。本研究通过对突变库质量的评价，结合高通量筛选方法和系统生物学方法，证明ARTP能够成为微生物快速进化育种的平台技术。