【摘 要】
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本研究是对黄芪蛋白体外消化的初步研究,旨在从黄芪蛋白的酶切产物中获取功能性寡肽.从黄芪种子中使用碱提酸沉法,通过粉碎、离心、冷冻干燥等步骤,得到黄芪蛋白.使用胃蛋白
【出 处】
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中国生物化学与分子生物学会中医药生物化学与分子生物学分会2013年第七届学术年会
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本研究是对黄芪蛋白体外消化的初步研究,旨在从黄芪蛋白的酶切产物中获取功能性寡肽.从黄芪种子中使用碱提酸沉法,通过粉碎、离心、冷冻干燥等步骤,得到黄芪蛋白.使用胃蛋白酶和胰蛋白酶对其进行体外消化研究.黄芪蛋白配成1mg/mL溶液,37℃水浴加热处理5min,冷却至室温,用HCl调pH至1.5,加胃蛋白酶(E/S=1∶25;1∶50;1∶100),37℃水浴加热处理2h,冷却至室温,用NaOH调pH至8.0,加胰蛋白酶(E/S=1∶25;1∶50;1∶100),37℃水浴加热处理2h,所有终溶液90℃水浴加热处理10min.所得水解产物采用SDS-PAGE分析分子量分布及水解率.凝胶浓度:5％;电泳条件:200V,20min;电泳缓冲液:MES;上样量:5μl;Marker: 1KD-100KD.电泳结束后,取下凝胶,进行银染显色分析,结果:胃蛋白酶E/S=1∶25与E/S=1∶50的水解率无明显差异,但显著优于E/S=1∶100.胰蛋白酶E/S=1∶25的水解率最高,因此胃蛋白酶E/S=1∶50和胰蛋白酶E/S=1∶25为黄芪种子蛋白体外消化的最佳条件.
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