【摘 要】
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目的 探讨ILK在CoCl2化学缺氧诱导的瘢痕成纤维细胞增殖中的表达及作用.方法 体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,将细胞置入不同浓度的CoCl2中,应用荧光定量/定性PCR法检测
【机 构】
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510220 广州市暨南大学附属广州市红十字会医院烧伤整形科
【出 处】
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第十届全国烧伤救治专题研讨会暨福建省第八次烧伤外科学术研讨会
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目的 探讨ILK在CoCl2化学缺氧诱导的瘢痕成纤维细胞增殖中的表达及作用.方法 体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞,将细胞置入不同浓度的CoCl2中,应用荧光定量/定性PCR法检测成纤维细胞ILK mRNA的表达.然后选择最适COCl2浓度(100umol/L)进行缺氧刺激,观察ILK不同时间点蛋白的表达.再将细胞分为3组①对照组,②con-siRNA,⑨ILK siRNA组,将三组细胞均置于不同浓度的CoCl2中,采用XTT法检测细胞增殖水平.结果 RT-PCR结果 显示,在CoCl2 100umol/L时,成纤维细胞ILK mRNA表达最高(F=50.958,P=0.000),从CoCl2 150umol/L起ILK mRNA表达水平开始下降；CoCl2 100umol/L作用于瘢痕成纤维细胞后,24h内不同时间点的ILK蛋白的表达逐渐升高.XTT结果 显示经ILK siRNA转染的细胞增殖水平无明显变化(F=2.542,P 0.056),未经ILK siRNA转染的细胞在CoCl2 100umol/L时增殖水平最高,150umol/L起增殖下降.结论 ILK可能为成纤维细胞应对缺氧应答的关键蛋白,轻度缺氧可以提高成纤维细胞ILK的活性,促进瘢痕成纤维细胞增殖,而重度的缺氧可以降低ILK的活性,抑制细胞增殖.
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