【摘 要】
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目的:观察采用RNA干扰技术降低食管癌细胞中基因MDC1的蛋白表达后,对照射后食管癌细胞中基因CHK1和CHK2的蛋白表达和细胞周期改变的影响。 方法:采用MTT法和克隆形成实验检测
【机 构】
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河北医科大学第四医院暨河北省肿瘤医院放三科 050011
【出 处】
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中华医学会放射肿瘤治疗分会六届二次暨中国抗癌协会肿瘤放疗专业委员会二届二次学术会议
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目的:观察采用RNA干扰技术降低食管癌细胞中基因MDC1的蛋白表达后,对照射后食管癌细胞中基因CHK1和CHK2的蛋白表达和细胞周期改变的影响。
方法:采用MTT法和克隆形成实验检测ECA109,ECA109-N、ECA109-M食管癌细胞之间细胞增殖和放射敏感性之间的差别;采用流式细胞技术检测5Gy照射后1h、2h、12h、24h和48h,ECA109、ECA109-N、ECA109-M细胞周期和凋亡的变化;采用westem blotting检测CHK1和CI-tK2蛋白表达、激光共聚焦显微镜检测细胞核内MDC1斑点形成的变化。
结论:食管癌细胞ECA109-M的放射敏感性高于ECA109-N, ECA109,提示转染对ECA109细胞具有放射增敏作用;SGy照射后12小时以后,食管癌细胞ECA109-M的G2期阻滞明显消除;ECA 109-M细胞接受SGy放射线照射后,对下游蛋白CHK1和CHK2表达没有明显影响,但对C H K2-T68磷酸化水平具有明显抑制作用,而且细胞核内MDC1斑点的形成明显减少。
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